Hay tres grupos principales de rotavirus que causan diarrea en cerdos: Rotavirus A, Rotavirus B y Rotavirus C. Cada grupo de virus es diferente a los demás y requiere pruebas específicas diseñadas para ellos. La diarrea en cerdos suele implicar infecciones con múltiples grupos de rotavirus al mismo tiempo.
Prueba disponible:
Patología macroscópica
- Evalúa la presencia de adelgazamiento de la pared del intestino delgado que puede sugerir la presencia de enfermedad.
- Localización de las lesiones: yeyuno e íleon.
- Ventajas:
- Resultados rápidos y económicos
- Aplicable a los tres grupos de rotavirus.
- Desventajas:
- No diagnóstico: se pueden encontrar lesiones similares en otras enfermedades, especialmente en infecciones por coronavirus (gastroenteritis transmisible, diarrea epidémica porcina y delta coronavirus porcino).
- Requiere tejidos frescos (<15 min) ya que la descomposición cambia drásticamente la apariencia del intestino delgado.
- No distingue entre diferentes grupos de rotavirus
Atrofia de las vellosidades causada por rotavirus. Enfermedades porcinas fotografía de Perle Zhitnitskiy, DVM, MSpVM. Fuente: Dr. Carlos Pijoan https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
histopatología
- Evalúa la presencia de lesiones tisulares (atrofia de las vellosidades del intestino delgado) que pueden sugerir fuertemente la presencia de una enfermedad.
- Tipos de muestras: tejido de yeyuno e íleon.
- Ventajas:
- Confirma atrofia de las vellosidades que sugiere enteritis viral
- Desventajas:
- Es necesario fijar los tejidos intestinales con formalina en menos de 15 minutos después de la muerte del animal. El tejido intestinal se descompone rápidamente
Inmunohistoquímica (IHC)
- Detecta la presencia de antígeno viral.
- Tipos de muestras: tejido de yeyuno e íleon.
- Ventajas:
- Diagnóstico definitivo: puede confirmar la presencia del virus con lesiones asociadas.
- Desventajas:
- Actualmente solo está disponible para Rotavirus A y Rotavirus C (no disponible para Rotavirus B)
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
- Detecta la presencia de una secuencia de ácido nucleico (ARN) viral específica
- Tipos de muestras: tejidos intestinales de yeyuno e íleon, hisopos fecales, heces.
- Ventajas:
- La PCR multiplex puede detectar diferentes grupos de rotavirus, incluidos Rotavirus A, Rotavirus B y Rotavirus C.
- Alta sensibilidad.
- Cuantificación por PCR
- Costo moderado
- A menudo se pueden combinar muestras de heces o tejidos para reducir costos y minimizar la pérdida de sensibilidad (especialmente con respecto a la relevancia clínica).
- Desventajas:
- Alta sensibilidad: puede confirmar la presencia del virus pero no la enfermedad (alta prevalencia del virus en el medio ambiente)
Aislamiento de virus
- Aísla el virus vivo.
- Tipos de muestras: tejidos intestinales de yeyuno e íleon, hisopos fecales, heces.
- Ventajas:
- Aislamiento del virus para su uso en el desarrollo de vacunas (vacunas autógenas)
- Desventajas:
- caro
- Resultados lentos
- Actualmente solo está disponible para Rotavirus A y no para Rotavirus B o Rotavirus C.
- A menudo es difícil de cultivar (muchos falsos negativos)
- La manipulación de muestras del campo al laboratorio puede afectar la supervivencia del virus
Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA)
- Detecta la presencia de anticuerpos.
- Tipos de muestra: suero.
- Ventajas:
- Los animales siguen siendo positivos durante varias semanas.
- Puede identificar granjas negativas
- Desventajas:
- La alta prevalencia del virus en el medio ambiente da como resultado una exposición común en muchos o la mayoría de los cerdos.
- Requiere una prueba específica para cada grupo de rotavirus
- No existe protección cruzada entre diferentes grupos de rotavirus.
Tabla 1. Resumen de pruebas aplicables respecto a los diferentes grupos de rotavirus.
| Rotavirus A | Rotavirus B | Rotavirus C | ¿Te permite diferenciar entre grupos? | |
|---|---|---|---|---|
| Patología macroscópica | Sí | Sí | Sí | No |
| histopatología | Sí | Sí | Sí | No |
| Inmunohistoquímica (IHC) | Sí | No | Sí | Sí |
| Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) | Sí | Sí | Sí | Sí |
| Aislamiento de virus | Sí | No | No | No |
| Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) | Sí | No | No | No |
Interpretación de resultados:
Patología macroscópica
- Positivo: Confirmación preliminar de la presencia de adelgazamiento intestinal.
- Negativo: Los casos tempranos o leves pueden no manifestar lesiones intestinales extensas.
histopatología
- Positivo: Confirmación de la enfermedad, pero no de la causa de la misma.
- Negativo: Los negativos o las lesiones no se detectan si se analiza la muestra incorrecta o si se realiza demasiado tiempo después de la infección.
IHC
- Positivo: el virus está presente en el sitio de la lesión.
- Negativo: Negativo o no se detecta el virus si la prueba se realiza mucho después de la infección o la concentración del virus es demasiado baja (solo está presente por un corto período de tiempo).
PCR
- Positivo: Confirmación de la presencia de los diferentes grupos de rotavirus (A, B y C).
- Negativo: Negativo, no se detecta el virus si la prueba se realiza mucho después de la infección o por una incorrecta selección o manipulación de la muestra.
Aislamiento de virus
- Positivo: Confirmación de la presencia del virus pero no de la enfermedad.
- Negativo: Negativo, el virus no se detecta si la prueba se realiza mucho después de la infección o simplemente no puede crecer debido a otra contaminación o mala manipulación (presente pero muy difícil de cultivar). No detecta Rotavirus B ni Rotavirus C.
ELISA
- Positivo: Exposición previa (> 2-4 semanas) a vacuna o virus de campo. No hay asociación de positividad y enfermedad.
- Negativo:
- Negativo a vacuna o virus de campo.
- Infección demasiado reciente para ser detectada
Escenarios:
Lechones recién nacidos con diarrea (aguda o crónica)
- Recolecte muestras fecales de 10 o más cerdos con diarrea no tratados y envíelas para pruebas de PCR para rotavirus A, rotavirus B y rotavirus C en grupos de 5.
- Necropsia de 1-3 cerdos recientemente muertos o cerdos sacrificados con diarrea. Evalúe macroscópicamente el yeyuno y el íleon en busca de adelgazamiento de la pared intestinal. Recoger muestras y fijarlas en formalina para histopatología e IHC.
Lechones recién destetados con diarrea (aguda o crónica)
- Recolecte muestras fecales de 10 o más cerdos con diarrea no tratados y envíelas para pruebas de PCR para rotavirus A, rotavirus B y rotavirus C en grupos de 5.
- Necropsia de 1-3 cerdos recientemente muertos o cerdos sacrificados con diarrea. Evalúe macroscópicamente el yeyuno y el íleon en busca de adelgazamiento de la pared intestinal. Recoger muestras y fijarlas en formalina para histopatología e IHC.